试验成立条件﹕转印在标准布上试验菌数达到 １﹒０×１０６ 个以上，增殖值（±０﹒５ 以内）Ｆ＝Ｍｃ－ Ｍｄ﹒Ｍｄ 为刚转印标准布上的生菌数对数值﹔Ｍｃ 为在试验布上培养 １-４ｈ 后生菌数的对数值﹒
２ ＡＴＰ（生物发光法）测定细菌数
纺织品上细菌含量测定已沿用 １００ 多年，采用将试样上冲洗菌液，在琼脂上培养（３７±１）℃，（２４￣４８）ｈ后，再测定数量，操作繁杂且费时，精度不高﹔而用 ＡＴＰ（生物发光法）测定，省时、省力，在技术上是一大进步﹒
利用荧光虫的荧光素 进行高灵敏度 ＡＴＰ 测定的原理早在 １９５０ 年已发现﹒近年来用基因重组技术完成了无性繁殖的微生物生产虫荧光素 ，解决了虫荧光素 性能稳定性，而基因改性解决了“ 耐热性”、“ 耐表面活性剂”等问题﹔去除样本中游离 ＡＴＰ，从膜过滤改为 分解技术，解决了游离 ＡＴＰ 问题﹔采用低噪音、感度达 １０１３Ｍ、性能稳定的光电倍增管光量测定仪元件，才使它成为许多领域中一项乐意采用的新技术﹒
日本纤维制品新功能评估协议会（ＪＡＥＥＴ）已将ＡＴＰ 测定法作为日本纺织品的抗菌性试验法抗菌效果（ＪＩＳ Ｌ １０９２﹕２００２）中增加了一个新的细菌数测定方法，同时也向 ＩＳＯ 推荐采用﹒
ＡＴＰ（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，三磷酸腺 ）是生物体内一种贮藏能源的化学物质，肌肉运动能源提供者，也是生物体产生各种物质的 反应能源﹒因此，有生命活动的地方一定有 ＡＴＰ 存在﹔反之，存在 ＡＴＰ 表示有生物存在的可能性﹒细菌细胞中也含有固定的 ＡＴＰ量，同一种细菌处于对数繁殖期和稳定期其 ＡＴＰ 含量不同﹒细菌一旦死亡，ＡＴＰ 会被细胞内的分解 立刻分解殆尽﹒由此可测得样本中 ＡＴＰ 浓度用它再除以各菌种不同状态下每一个细菌的 ＡＴＰ 数量就可求得样本中的活菌数﹒利用此原理可以方便测定制备试验菌液以及培养后的活菌数﹒
ＡＴＰ 生物化学发光测定操作概要﹕（１）在 ＡＴＰ 试验菌液（或接种菌液）以及冲洗的菌液中添加 Ａｐｙｒａｓｅ （腺 三磷酸双磷酸 ）与腺 胱氨 ，利用 分解将菌体外的游离 ＡＴＰ 去除﹔（２）在去除游离 ＡＴＰ 菌液中加入 ＡＴＰ 萃取剂进行萃取﹔（３）萃取后，加入由虫荧光素和 Ｄ－ 虫荧光素组成的发光试剂，然后用光电倍增管测定由 ＡＴＰ 和发光试剂反应发出的荧光光量，其反应式如下﹕
由发光量可求得 ＡＴＰ 浓度（ｍｏｌ／Ｌ），再用 ＡＴＰ 浓度除以如表 1 所示不同菌种在不同状态下每一个细菌的 ＡＴＰ 量，即为样本中活菌浓度（个／ｍＬ）﹒
表 1 各菌种每一细胞 ＡＴＰ 量
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