为了达到碱前处理效果,在生物酶前处理时,需要加人乳化性、去疏水性物质能力强的表面活性剂(如TX一10等).另外,生物酶的分子结构复杂,分子质量大,渗透性差,为提高效果,有时尚需要加人棉纤维的溶胀剂f如尿素等).实际上棉织物的生物酶前处理是多种生物酶和多种助剂协同作用的结果.将淀粉酶和果胶酶同各种助剂预先混合配成复合酶制剂储存,可缩短前处理配液周期,简化生产步骤.但是,各种酶之间复合对酶活性是否有影响,助剂对各种酶的酶活性是否有影响,以及复合酶的存放条件,如存放温度、存放时间对酶活的影响尚没有进行过研究.本试验对由淀粉酶、果胶酶、非离子表面活性剂TX一10和尿素组成的复合酶液的存放条件、复合酶液中各组分对酶活性的影响进行了研究.
1试验
1.1材料
纯棉精梳府绸(14.5 x14.5,133x72)、DNS(3,5一二硝基水杨酸),TX一10、尿素,2000L淀粉酶、碱性果胶酶(丹麦诺维信公司),复合酶【质量比m(淀粉酶):m(果胶酶):m(Tx一1O):m(尿素):m(水)=3:1:5:1O:2O】.
1.2纯棉府绸织物复合酶前处理工艺
热水预处理(95℃热水洗3次,冷水洗1次,轧干)一三浸三轧酶液(复合酶液39 L,pH值6.5—7.0,轧余率50%以上)一汽蒸(70 oC,1 h)一热水洗(3次)一冷水洗(1次)一烘干.
1.3测试方法
棉织物上果胶含量-草酸铵萃取一咔唑比色法团;复合酶中果胶酶酶活:紫外分光光度法测定果胶酶对底物果胶的裂解产物在239 nm下的吸光度(oo值),间接确定复合酶中果胶酶的酶活;复合酶中淀粉酶酶活:淀粉酶对底物可溶性淀粉酶解反应生成的产物具有还原性,和DNS显色剂反应生成有色物质,采用分光光度计测定生成的有色物质的吸光度(OO值)间接测定淀粉酶的酶活.
2结果与讨论
2.1存放条件对单一果胶酶酶活的影响
表1是单一果胶酶在室温和40℃下存放不同时间后测定的OD值.表2是在室温和40℃下存放不同时间后的单一果胶酶对纯棉府绸织物的果胶去除率.
由表1、表2可知,单一果胶酶在室温和40℃存放后,酶解产物的吸光值没有明显变化.处理织物的果胶去除率也无大幅度变化,也证明了存放条件、存放温度和时间不是造成复合酶液中果胶酶酶活下降的因素.
2.2存放条件和复合酶组分对果胶酶酶活的影响
2.2.1存放条件
用果胶裂解酶得到的裂解产物为不饱和半乳糖醛酸,分子结构中含有不饱和共轭体系,在239 nm波长下具有特征吸收峰[3】,因此,可以用果胶酶对果胶的裂解产物在239 nm波长下的吸光度(OD值)来间接反映果胶酶的活力.OD值越大,果胶酶裂解产物越多,说明果胶酶的酶活越高.表3是复合酶在室温和40℃下存放不同时间后测定在239 nm波长下的OD值.表4是在室温和40℃下存放不同时间后的复合酶对纯棉府绸织物处理后的果胶去除率.
从表3和表4可知,室温下存放的复合酶对果胶酶酶解产物的OD值随存放时间的延长逐渐降低,而在40℃下存放的OD值迅速下降.果胶去除率,也有相同的规律,显示出OD值和果胶去除率有很高的相关性.因此,用239 nlTl下的吸光度可以间接反映果胶酶的酶活性变化,也证实了存放条件或者复合酶中的其他组分对果胶酶酶活有严重影响.
2.2.2复合酶组分对果胶酶酶活的影响
除了果胶酶外,复合酶中还有淀粉酶、非离子表面活性剂TX一10、尿素等,这些组分可能对果胶酶的酶活产生影响.将果胶酶分别与淀粉酶、TX一10、尿素按一定比例混合后在室温和40℃存放不同时间,测定果胶酶酶解产物的OD值以及对纯棉府绸织物的果胶去除率.
2.2.2.1淀粉酶
表5是质量比m(果胶酶):m(淀粉酶):m(水):1:3:20的复合酶液在不同温度存放不同时间后,对底物果胶的水解产物在239 nm下的OD值,表6是上述酶液对纯棉府绸织物果胶的去除率.