1.6染料脱色方法
脱色条件采用:选用的脱色体系总体积为10mL,用柠檬酸-Na2HPO4缓冲液把脱色体系的pH值调至5,给酶量0.1 U·mL-1,温度为30℃,活性艳蓝KN-R和活性艳蓝X-BR的浓度分别采用50 mg·L-1和100 mg·L-1.脱色率的计算方法:采用紫外分光光度计在染料的最大吸收波长下测出吸光度,根据标准曲线转化成相应的质量浓度,染料脱色率(%)的计算公式[16]:脱色率(%)=(A0-At)/A0×100%式中:A0、At分别表示初始时刻和t时刻染料在特征波长处的吸光值浓度吸光值.实验重复3次,取平均值.
2·结果与分析
2.1时间对脱色率的影响
从图3可以看出活性艳蓝KN-R和活性艳蓝X-BR的脱色率随时间增加而增大,活性艳蓝X-BR和活性艳蓝KN-R分别到第6 h和第5 h后的脱色率不再随时间增加而增加,维持在一个稳定范围;这时的活性艳蓝KN-R脱色率达83.02%,活性艳蓝X-BR脱色率达50.02%.因此以后实验活性艳蓝KN-R脱色时间选为6 h,活性艳蓝X-BR脱色时间选为5 h.
2.2温度对脱色率的影响
从图4中看出随着温度的升高,活性艳蓝KN-R和活性艳蓝X-BR的脱色率都在逐渐升高,当温度为30℃时它们的脱色率都达到最高.而当温度继续升高,脱色率迅速下降这是因为温度升高酶的失活越来越明显,能用于催化反应的酶减少因而脱色率降低.
2.3 pH值对脱色的影响
从图5可以看出pH值的变化对活性艳蓝KN-R和活性艳蓝X-BR的脱色率有很大影响,pH在4~6之间它们的脱色效果都很好,活性艳蓝KN-R的最适pH为5,活性艳蓝X-BR的最适pH为4.这是因为pH值的变化会改变离子平衡和蛋白质的解离状态,对酶的活性造成很大影响.