蚕丝是一种重要的天然蛋白质纤维，主要由70～80％丝素，20～30丝胶及少量的蜡质和无机物组成，而且在蚕丝加工过程覆于丝素外围的丝胶通常被作为废弃物随废水一起排放。组成丝胶的18种氨基酸中，有8种是人体必需氨基酸，其含量高达17，而且高含量的丝氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸、丙氨酸具有多种的药理作用如抗氧化、防治高血压、防治糖尿病和防治老年痴呆等。丝胶也可以作为冰冻糕点良好形成剂，话梅腌制的营养调味液和饮品用水的添加剂，起到杀菌、防腐和美味的作用，因此丝胶作为食品添加剂具有重要的应用价值。从丝绸废水中提取丝胶是开发利用丝胶的重要环节，提取的方法主要有：化学混凝法、酸析法、有机溶剂法、离心法、超滤法等。江苏泗绢集团有限公司提供的丝绸废水是采用高温高压爆破法对茧丝脱胶后的废水，因此丝绸废水中无机盐杂质的含量较低，有利于简化提取丝胶的工艺。本文利用江苏泗绢集团有限公司提供的丝绸废水，从丝胶性质与结构分析比较酸析法和低温乙醇沉淀法提取丝胶的效果，提出低温乙醇沉淀法提取丝胶工艺流程，为丝胶在食品中的开发利用提供理论依据。1材料与方法1．1实验材料与仪器采用高温高压爆破法将茧丝脱胶后形成的生产废水(由江苏泗绢集团有限公司提供)，纯KBr、HC1、无水乙醇、苯酚和H SO为国产分析纯试剂。热回流提取浓缩机组IOOL型号(江苏天宇机械有限公司)，QZR一5型高速离心喷雾干燥器(无锡市林洲喷物干燥器厂)，Consol 24真空冷冻干燥机(美国Consol公司)，J715型圆二色光谱仪(日本JAS—co公司)，Nexus傅立叶变换红外光谱仪(美国Thermo Electron公司)，4K15冷冻离心机(Sigma公司)，LXJ—II沉淀离心机(上海医用分析仪器厂)，超级恒温水浴(3z海市实验仪器总厂)。1．2实验方法1．2．1丝胶粗粉末的制备丝绸废水经过4层纱布过滤除去肉眼可见的杂质，在料液温度为60。C，真空度为0．085 MPa的工艺条件下进行真空浓缩，固形物含量为8～9的浓缩液在进风温度为195～200℃，出风温度为80～83℃条件下进行喷雾干燥，制成固体粉末。1．2．2酸析法回收丝胶丝胶粗粉末按1：2O(g：mL)加入去离子水，用0．5 mol／L HC1溶液调不同pH值，恒温搅拌30min，在8 000 r／min下离心20 rain，沉淀为提取的蛋白，经冷冻干燥计算冻干品的质量数，与粗粉末比较计算丝胶提取率。丝胶提取率／％=(丝胶提取物干重／喷物干燥粗粉末干重)×1001．2．3低温乙醇沉淀法回收丝胶丝胶粗粉末按1：10(g：mL)加入去离子水配成溶液，在4℃下预冷，然后在搅拌条件下缓慢加入在一18℃预冻的无水乙醇并且快速搅拌混合，混合液中乙醇体积分数分别为30、50、70％、75和90。混合液在一18℃下静置过夜，经3 500 r／min离心15 rain，用少量的蒸馏水溶解沉淀，减压蒸馏去除乙醇，浓缩液冷冻干燥制得丝胶粉末。丝胶提取率分析同酸析法。1．2．4丝胶理化性质分析蛋白含量测定采用凯氏定氮法，灰分测定采用灼烧法，总糖含量测定采用苯酚硫酸法，溶解度测定采用张雨青的方法，蚕腥味的分析通过嗅闻辨别。1．2．5圆二色光谱(CD)分析测定条件：丝胶水溶液浓度0．2 mg／mL，比色皿光径0．1 cm，分辨率1．0 nm，扫描速率100 nm／min，累积5次，测定远紫外区185～250 nm范围的CD光谱。
2．2丝胶理化性质的分析对2种方法提取的丝胶进行蛋白含量(总氮含量×6．25)、总糖含量、灰分含量、溶解度、蚕腥味的分析，结果见表1。从表1可以看出，丝胶中90以上的成分是蛋白质，因此可以用提取物干重计算蛋白的提取率。酸析法提取的丝胶蛋白理化性质与喷雾干燥得到的丝胶相近，变化很小。与喷雾干燥得到的丝胶相比，醇沉的丝胶溶解度下降明显，可能是由于乙醇对蛋白分子构象的影响产生的，但低温乙醇沉淀法提取的丝胶灰分含量较小，没有明显的蚕腥味，这说明低温乙醇沉淀法提取丝胶能进行有效脱灰和除异味，得到较纯净的丝胶粉。
2．3丝胶二级结构分子构象的分析2．3．1圆二色光谱分析以喷雾干燥得到的丝胶作对照，应用圆二色光谱法分析2种方法提取的丝胶溶液中蛋白质二级结构分子构象的变化，并参照CD光谱利用仪器提供的软件：the Model J WSSE一4 80 Protein Secondary Struc～tureEstimationProgram，由仪器提供的Yang氏。公式估算二级结构中a螺旋，8折叠，p转角和无规卷曲所占的摩尔百分比。所得CD光谱见图4，软件分析结果见表2。
[1][2]下一页>>
相关信息 
推荐企业 推荐企业
推荐企业
您所在的位置：
