显色体系的选择：硼酸介质：4 g硼酸溶于1 L水中，碘-碘化钾溶液：升华过的碘6．5 g及25 g碘化钾溶于蒸馏水中，稀释至1 L。将两种溶液以体积比5：1混合。
标准曲线的绘制方法：配制100 mg／L-1 000 m LPVA系列标准溶液，加入5．00 mL标准溶液， 6．00 mL显色剂，定容至30．00 mL，摇匀，显色20 min，在690 nm处测吸光度，绘制标准曲线。
表1列出了以上几位研究员应用单波长分光光度测量的操作条件及测量范围。
1．2 双波长分光光度测定法
退浆废水中一般都含有淀粉等其它组分，理论上可以根据PYA和淀粉与碘都能显色，吸光度具有加和性，用单波长分光光度法同时测定，但对于淀粉和PVA吸收峰相互重叠的双组分试样，用单波长分光光度法必须解联立方程，才能同时测定，计算繁琐。采用双波长分光光度法则比较简单，可同时对吸收曲线部分重叠或完全重叠的多组分体系进行快速测定。
1．2．1 原理
溶液中有两种物质，在两个波长λ1、λ2状态下测定出吸光度Al、A2，根据朗伯-比尔定律：
双波长分光光度法测定x、y组分体系中X组分的浓度是从Y组分的吸收光谱曲线上选出具有相同吸光度的两个波长，波长λ2(通常为测定波长)和波长λ1(参比波长)进行波长组合。因此，波长组合 λ1和λ2的选取是方法的关键。
对双组分混合体系，所选择的波长组合λ1、λ2必须符合两个必要条件：(1)在这两个波长处，共存组分应具有相同的吸光度(等吸光度点)，即△A=0；(2)在这两个波长处，待测组分的吸光度差值△A应足够大。波长组合λ1、λ2的选择一般采用双波长等吸光度点作图法选定。以测定x．y两组分混合体系中X组分为例，选择x的最大吸收波长λ2为测定波长，从此点作波长轴的垂线，与Y的吸收光谱曲线交于一点，过此点作波长轴的平行线，与y的吸收光谱曲线相交于另外一点，即为等吸光度点。以此作为参比波长λ1，用此波长组合测定x、Y混合体系中X组分的含量时，测得的△A值与Y组分浓度无关。如果有多个等吸光度点，则应选择△A值较大，且波长差较小的两波长组合，以提高测量的精密度。此外，测定波长也不一定在待测组分的最大吸收处，只要满足△A足够大即可。
1．2．2 应用实例
范雪荣等对同时测定组合浆料中PVA和淀粉含量的双波长分光光度法进行了研究。参考PVA(10 m/L)和淀粉(80 mg／L)的吸收光谱曲线及双波长等吸光度点作图法，选取λ2= 624 nm，λ1=500 nm为测定混合组分中PVA的参比波长。
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