2.9百合中总生物碱的含量测定取江苏宜兴、甘肃兰州、浙江湖州和湖南龙山产地的百合饮片，分别按“2.2”项下方法制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液3.0mL，置于分液漏斗中，按“2.4”项下方法操作，于414nm处依法测定吸光度。根据标准曲线计算百合总生物碱的含量，结果见表2。
3·讨论
经查阅，2010版《中国药典》中仅记载有百合药材的鉴定方法，并未有其相关的定量指标。生物碱类成分是百合主要的抗肿瘤活性成分。然而，除了秋水仙碱外，百合中与秋水仙碱具有相同结构的卓酚酮类生物碱也具有较好的抗癌活性，且秋水仙碱在药材中的含量低，若仅以秋水仙碱作为含量测定指标，并不能代表整个药材的抗肿瘤活性成分。因此，选择总生物碱为检测指标，以秋水仙碱为对照品，采用酸性染料比色法测定百合中总生物碱的含量，从而建立百合含量测定指标。笔者运用此方法，对江苏宜兴、甘肃兰州、浙江湖州和湖南龙山产地百合中的总生物碱分别进行了含量测定，由测定结果得知，百合总生物碱的含量在0.438%～0.749%，其中以甘肃兰州产地居高，江苏宜兴最低。
酸性染料比色法是一种测定总生物碱含量的较好方法，灵敏度高，专属性较好。酸性染料比色法对实验条件的要求较为严格，选择合适的测定条件是关键。在总生物碱含量测定时，缓冲溶液pH、酸性染料用量和氯仿用量是显著的影响因素。本试验分别考察了pH=3.2、3.4、3.6、3.8、4.0的醋酸-醋酸钠缓冲溶液、用量为3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL的酸性染料和用量为3.0、5.0、10.0、15.0、20.0mL的氯仿溶液对生物碱与酸性染料结合程度及其络合物被萃取程度的影响。依据测定吸光度值的大小，最终确定缓冲溶液pH3.6、酸性染料用量5.0mL、氯仿用量10.0mL为酸性染料比色法测定百合总生物碱的最佳萃取显色条件，并且在实验过程中严禁在氯仿萃取液中混入水分，否则会使溶液变浑浊，影响比色结果。故在测定吸光度前，必须用脱水剂（如无水硫酸钠）除去萃取溶剂中的水分。
此外，实验中发现溴甲酚绿显色剂放置一段时间后会不稳定，因此显色剂应现用现配。从而可以保证测定结果准确、可靠、稳定。 在实验过程中，以总生物碱的含量高低为指标，对百合中总生物碱的提取方法（包括乙醇回流、氯仿超声、酸水超声、酸水回流）进行了考察。经测定发现，采用酸水回流提取的方法，可使百合中的总生物碱成分提取完全，从而有利于百合充分发挥抗肿瘤的药效。
4·参考文献
[1]国家药典委员会.中国药典.一部.2010：123
[2]李天真.百合功能性因子的研究进展.食品科技，2007（7）：248第一作者：杜萌（1986-），硕士研究生，研究方向为中药复方及新药研究。
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