1.2.3.2精密度考察。精密吸取标准品溶液10ul重复进样5次,测定峰面积,计算得峰面积相对标准偏差(RSD)值。
1.2.3.3稳定性考察。取棉团铁线莲根药材粗粉按1.2.2制备成样品,在室温下保存,分别于第0、2、4、8、12h测定,计算峰面积RSD值。
1.2.3.4重现性考察。取棉团铁线莲根样品5份,分别按1.2.1中色谱条件测定,计算样品中齐墩果酸峰面积RSD值。
1.2.3.5加样回收率试验。精密称定5.0g棉团铁线莲根样品各5份,分别按供试品溶液方法制备。精密吸取样品液1m,l在每份中加入齐墩果酸标准品0.2052mg/ml各1m,l进样分析,计算平均回收率和RSD值。
1.2.4样品含量测定。分别取棉团铁线莲根、茎叶供试品溶液进行HPLC测定,进样量均为10,l平行进样3次,计算齐墩果酸含量。
2结果与分析
2.1方法学考察结果
2.1.1线性关系。由图1可知,齐墩果酸标准品在5~6min出峰,计算得回归方程为y=24208x-126.8,r=0.9991。结果表明,齐墩果酸在0.2052~1.0260mg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系。
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2.1.2精密度。计算得峰面积RSD值为0.58%,表明仪器精密度良好。
2.1.3稳定性。计算得峰面积RSD值为0.89%,表明齐墩果酸在12h内稳定。
2.1.4重现性。计算得RSD值为1.51%,表明样品处理过程和测定方法均有良好的重现性。
2.1.5回收率。计算齐墩果酸平均回收率为99.8%,RSD值为1.12%。
2.2样品测定结果棉团铁线莲根、茎叶中齐墩果酸测定结果如图2、3所示。计算得棉团铁线莲根中齐墩果酸的平均含量为0.1752%,茎叶中齐墩果酸的平均含量为0.0963%。
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3结论与讨论
齐墩果酸为棉团铁线莲所含的主要皂苷元,其含量的测定在一定程度上能反映药材的质量。研究表明,不同产地的棉团铁线莲中齐墩果酸的含量也不同,河北产的棉团铁线莲齐墩果酸含量较高,辽宁产的较低。该试验结果表明,吉林通化地区所产的棉团铁线莲齐墩果酸含量也较低,其中棉团铁线莲的茎叶中齐墩果酸含量略低于根。该测定方法操作简单、灵敏、重现性好,可用于棉团铁线莲中齐墩果酸的含量测定。该研究为评价棉团铁线莲茎叶药用价值提供了参考,为进一步研究开发其药用资源和质量控制提供了科学依据。
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