分光光度法(仲裁法)

8 原理 在催化剂存在下,用硫酸裂解淀粉及其衍生物,然后碱化反应产物,并进行蒸馏使氨 释放,同时用硫酸溶液收集,再加入奈氏试剂,用分光光度计测定铵盐,并转化成氮含量。

9 试剂 在测定过程中,只可使用分析纯的试剂和蒸馏水,或至少纯度相当的水。 9.1 浓硫酸:96%(m/m)、ρ20为1.84g/mL。 9.2 氢氧化钠溶液:40%(m/m)、ρ20为1.43g/mL。 9.3 催化剂:由97g硫酸钾和3g无水硫酸铜组成。 9.4 硫酸铵。 9.5 硫酸:约0.1mol/L的标定溶液。 9.6 奈氏试剂:至少在使用前二天配备,将100g碘化汞(Ⅱ)和70g碘化钾溶于100mL水中,另将244g氢氧化钾溶于内有700mL水的1000mL容量瓶中,并使之冷却至室温。将上述碘化汞(Ⅱ)／碘化钾溶液慢慢注入容量瓶中,边注加边摇荡,加水至刻度,摇匀,放置至少2天,试剂应保存在棕色玻璃瓶内,置于暗处。

10 仪器 普通实验室仪器,特别需要的有:10.1 凯氏烧瓶:容量一般为500～800mL之间。 10.2 消化架:能使凯氏烧瓶以倾斜位置加热,并且仅使液面以下的瓶壁受热。 10.3 排气装置:能使凯氏烧瓶内溶液在消化时,有害气体不弥漫在室内。 10.4 凯氏定氮蒸馏装置:由抽空蒸馏瓶、蒸汽容入管、冷凝管、小漏斗、1000mL圆底烧瓶组成。 10.5 锥形瓶:容量为100mL。 10.6 容量瓶:容量为200mL。 10.7 吸管:容量适当。 10.8 分光光度计:能被调至430nm波长,并备有适当的比色皿。其光路长度应在测定报告 中说明。 10.9 研钵。 10.10 筛子:筛眼孔径为0.6mm。 10.11 分析天平。

11 分析步骤 11.1 样品的准备 所测样品应充分混合,放在密封干燥的容器内。对葡萄糖浆,在混合前应先除去表层约5mm。 对块状样品必