印染废水是我国主要的工业污染水之一,内含多种有毒难降解的染料.目前,有关该类废水的处理方法有物理化学方法和生物方法.其中生物法由于其高效、简易和脱色率高而受到重视.国内外学者对染料的微生物脱色降解进行了一系列研究[1-5].这些研究表明,利用微生物处理印染废水是一条可行的途径.球衣菌是活性污泥中一类重要的丝状菌,通常分布于小溪、湖泊、泉水等淡水环境和污水处理系统及输水管道中[6].目前,球衣菌已广泛应用于污水处理、生产生物可降解材料PHB、生物监测、富集重金属等方面[7-10].但有关球衣菌对染料废水的脱色研究尚未见相关报道.本文用富集、平板划线等方法从福州祥坂污水处理厂的活性污泥中分离到一株球衣菌,并就其对染料的耐受性及脱色特性进行了研究,旨在为进一步开展此类废水的工业化处理提供优良的微生物菌源及相关理论依据.1·材料与方法1.1菌种来源和染料菌种来源:福州祥坂污水处理厂曝气池各点活性污泥混合液20份.染料:直接耐晒黑、酸性黑ATT、碱性棕、碱性橙、碱性品蓝、孔雀石绿,均为工业用产品.其中直接耐晒黑、酸性黑ATT、碱性棕、碱性橙等为偶氮染料,酸性黑ATT最大吸收波长为596.5nm.1.2培养基1.2.1富集培养基尿素培养基(g/L):尿素0.5,葡萄糖1.0,MgSO4·7H2O0.05,K2HPO40.1,pH7.0.1.2.2分离纯化培养基CGY培养基(g/L):蛋白胨5.0,酵母膏1.0,甘油10.0,琼脂20,pH7.0.Stoke培养基(g/L):葡萄糖1.0,蛋白胨1.0,MgSO4·7H2O0.2,CaCl20.05,FeCl30.01,琼脂20,pH7.0.1.2.3耐受性实验培养基同Stoke培养基,不同的是加入各种不同浓度不同种类的染料.1.2.4脱色实验培养基同CGY培养基,不同的是加入酸性黑ATT染料,质

量浓度为0.1g/L.1.3球衣菌的富集、分离及初步鉴定1.3.1富集培养分别吸取各点活性污泥混合液0.5mL,接入装有4.5mL富集培养基的试管中,28℃静止培养24~48h,如发现有半透明絮状小团块飘浮于液体中,小心用接种针先挑取出少量,镜检结果表明为球衣菌时,即可进行分离.1.3.2分离培养将富集培养液内出现的絮状团块,用接种针挑出,先在无菌水中洗涤一次,然后在已制好的Stoke琼脂平板上进行划线分离,28℃培养24h后,对光仔细检查,如在划线条的两侧边缘有丝状体紧贴平板向外伸出,可用低倍镜进行初步镜检.如为球衣菌,应及时挑取离中间杂菌较远的丝状体在新的平板上进行划线,这样经过3~4次重复划线分离,即可提取出纯化的菌株.1.3.3菌种鉴定参照文献[6],对该菌株的细胞形态、培养特征和生理生化特征进行初步鉴定.1.4菌株对染料的耐受性研究将分离到的菌株接种于新鲜的CGY斜面,28℃培养3d后,用无菌水稀释制备成10-4,10-5,10-6菌悬液涂布于各种耐受性实验培养基固体平板上,于28℃下培养2d,观察菌株在各种染料及其相应各种浓度中的生长情况及脱色效果.