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用活性染料测定花椒总生物碱的含量探究

来源:印染在线 发布时间:2012年09月03日

花椒(Zanthoxylumbungeanum)属芸香科,全世界约有250种,分布于亚洲、美洲、非洲及大洋洲的热带和亚热带地区。我国约有45种,13个变种,主要品种为青椒(z.schinifoliumSieb.etZucc.),又名青川椒、崖椒,野椒,香椒子)和花椒(bungeanumMaxim.)又名川椒、秦椒、蜀椒、大红袍等。在“中国经济植物志”(1961)中花椒被列为芳香油植物范畴。花椒资源在我国分布很广,除东北和新疆以外的各地区均有分布,秦巴山区、太行山区和沂蒙山区等为我国重点花椒产地。花椒既是人们常用的食品调味料,被誉为“八大味”之一,又是一味传统中药,具有温中散寒、除湿、杀虫、止痛等作用口。花椒生物碱是花椒属植物中普遍含有的一类物质。截至近几年,从花椒属植物中分离得到的生物碱类主要有二十多种,生物碱含量的测定是评价花椒质量好坏的指标之一。酸性染料比色法常用于制剂中生物碱的含量测定,本文采用酸性染料比色法,以白屈菜红碱为对照品,花椒中总生物碱进行了含量测定,建立了花椒中总生物碱含量的测定方法,为花椒的质量控制和花椒深加工提供了科学依据。

1材料与方法

1.1仪器与材料

紫外一可见分光光度计(北京普析通用有限公司);PHS一4CT型数字酸度计(上海康仪仪器有限公司)。白屈菜红碱标准品(中国药品生物制品检定所),溴甲酚绿和其他试剂均为分析纯。

1.2实验方法

1.2.1试液配制

(1)pH值:7.6缓冲溶液的配制:0.2mol/LNaH2PO4(13.0mL)和0.2moL/LNa2HPO4(87.0

mL),酸度计校正为7.6。

(2)溴甲酚绿溶液的配制

称取0.05g溴甲酚绿加入磷酸缓冲液(pH值=7.6),定容至100mL,制得溴甲酚绿缓冲液。

(3)标准溶液的配制

称取5mg白屈菜红碱样品加入无水乙醇,定容至20mL,制得白屈菜红碱标准溶液(0.25mg/mL)。

1.2.2酸性染料比色法最大吸收波长的确定

分别吸取5mL对照品溶液,加入溴甲酚绿磷酸缓冲液2mL和10mL氯仿溶液,振摇1min后,倒人分液漏斗中静置1h,分取氯仿层,扫描最大吸收波长,以未加生物碱的氯仿萃取液为随行空白。

1.2.3标准曲线的绘制方法

分别吸取1,2,3,4,5mL对照品溶液,置于20mL试管中,加水补至5mL,依次加入2mL溴甲酚绿磷酸缓冲液2mL和10mL氯仿溶液,振摇1min后,倒入分液漏斗中静置lh,分取氯仿层,在此波长下测吸光度值,以生物碱含量为横坐标,吸光度值为纵坐标,做标准曲线。

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