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新型碱性果胶酶用于棉针织物精练的工艺优化

来源:印染在线 发布时间:2012年03月19日

1.3性能测试

1.3.1果胶裂解酶活力的测定

反应体系中包括酶稀释液20,含0.2%聚半乳糖醛酸的甘氨酸。NaOH(0.2mol/L)缓冲液(pH值为9.4,含有0.44mmol/L的CaC1,若测定碱性果胶酶Biopmp3000L和精练酶Scou=yme301L中果胶裂

解酶活力,则采用pH值为11.4的Biftton.Robinson广泛缓冲溶液)2mL,以活性的酶液作为空白对照,加入含底物的缓冲溶液开始酶促反应,反应条件为45℃,15min,用3mL的0.03mol/L的磷酸终止反应,在235am处测定其吸光度值。一个标准酶活单位

(1U)定义为:每分钟使聚半乳糖醛酸裂解产生1umol的不饱和聚半乳糖醛酸的酶量。不饱和聚半乳糖醛酸在235am处的摩尔吸光系数为

4600L/(mol·cm)。

1.3.2果胶裂解产物不饱和半乳糖醛酸的测定

利用果胶裂解酶对底物果胶降解的最终产物通常为不饱和二或三半乳糖醛酸(GA),它具有不饱和共轭体系和还原性的末端(还原性醛基),在紫外区(235am处)具有特征吸收峰,同时还原性醛基与

DNS发生显色反应的产物在540am处也具有特征吸收峰,因此可确定裂解产物在235am处吸光度(OD)和540am处吸光度(OD)之间的关系,最终根据OD。半乳糖醛酸质量浓度标准曲线确定裂解产物中半乳糖醛酸质量浓度(C。)与OD2,的关系:CGA=105.4X吸光度+1.7458,单位为~g/mL。以空白样中溶液调零,取1mL精练液加入5mL磷酸终止液中,在235am波长下,1cm石英比色皿测定吸光值(若吸光值大于1,则稀释10倍),精练浴中半乳糖醛酸的质量浓度C。=6Xc。。同时按DNS显色法”测定其在540am处的吸光度。

1.3.3织物失重率

将精练前后的织物分别在恒温恒湿箱中(温度20℃,相对湿度65%)平衡24h后称量,质量分别为m1和m2,精练后织物失重率=(ml—m2)Im1×100%。

1.3.4毛效

按标准定时法(30min)测定毛效。

1.3.5果胶去除率

按硫酸铵萃取一咔唑比色法定量织物的果胶含量。果胶去除率y的计算公式:

2结果与讨论

2.1 pH值

酶分子上有许多酸性和碱性的氨基酸侧链基团,要使酶具有活性,这些基团必须有特定的解离形式。随着pH值的变化,具有催化活性的离子基团在总酶量中所占的比例不同,因而使酶的催化能

力也不同。同样受pH值控制的底物基团(包括与酶分子结合的基团和反应基团)的解离状态也会影响酶解反应的效率。另外,酶是一种蛋白质,只有在一定的pH值范围内才稳定,否则会变性失活,所以每种酶都有它最适宜的pH值,在一定的pH值下,才能达到其活力的最大值。本文选择不同pH值条件考察了其对自制新型碱性果胶酶降解棉针织物上果胶后产物浓度和失重率的影响,结果如图1所示。

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