郝冀洪,任贵云,李顺义
纺织染料可染血细胞和骨髓中血细胞,有的可替代细胞化学染色,也有的可区分TH (CD4) 细胞和TC/ TS 细胞(CD) 细胞。近年Kass又进行了禽类血细胞染色,并取得了满意结果,已引起国内检验界的高度重视。自从“纺织染料在血细胞形态学检验中的应用”一文在《中华检验医学杂志》发表后,陆续收到各地读者来信或电话,询问有关纺织染色有关技术问题,为了促使这一技术尽快在国内推广,同时为国产纺织染料扩大应用范围,现就国内外利用纺织染料染色血细胞技术问题综述如下。
1 标本制备1. 1 纺织染料血细胞染色:所用的标本可采用末梢血涂片、骨髓涂片和外周静脉抗凝血浓集涂片等。1. 2 静脉抗凝血浓集涂片:通常抽取患者外周静脉血于含有乙二胺四乙酸的抗凝管中,在室温静置2h ,使红细胞自然沉降。用移液管从抗凝管中提取富含白细胞的血浆于离心管中,以2 500 r/ min 离心5 min ,移去上清液,剩下0. 1 mL 富含白细胞和血小板浓集液。用浓集细胞制成浓集涂片,晾干。
2 固定液固定是血细胞染色的重要步骤,纺织染料染色所用的固定液与传统的细胞化学染色方法所用固定液基本相同。Kass 常用的有Bouin 固定液(苦味酸饱和液75 mL ,冰乙酸5 mL , 37 %甲醛20 mL ) 、FAA 固定液(这是纺织染料血细胞染色常用的固定液,由95 %乙醇90 mL ,37 %甲醛5 mL 和冰乙酸5mL 配制而成, 严格密封于室温下保存1 年) 、甲醇。另外,国内外有的将纺织染料的甲醇液或乙醇液直接加在涂片上,使固定和染色同步进行 。
3 纺织染料3. 1 国外纺织染料: 碱性蓝122 , C. I. basic blue122 ,basacryl blue X4GFL (BASF ,Whippany ,NJ ) ;碱性蓝141 , C. I. b