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过氧化氢酶TF-160的酶活测定及其应用

来源:印染在线 发布时间:2009年10月16日

俞英珍,陈红梅(浙江传化股份有限公司,浙江萧山311215)

0 前言 棉制品氧漂处理后,若布面和水浴中残留双氧水,将破坏活性染料的反应性基团,使染料与棉纤维之间不能形成有效共价键,造成色浅、色花等染疵。对此,传统方法采用大量热水反复清洗来去除,这样不仅要耗费大量的水、电、汽,工艺冗长,且去除不完全,影响产品质量。采用过氧化氢酶对漂白后的棉制品进行处理可有效解决这些问题。另外,作为天然发酵的蛋白质,过氧化氢酶可生物降解,具有优良的环保性能。 过氧化氢酶的酶活测试有多种方法,如测定反应体系中生成氧气的量,有测压法、电极法等;测定反应剩余过氧化氢的量,一般有高锰酸钾法、碘量法;直接测定反应消耗的过氧化氢的量,则常用紫外速率法。由于碘量法简便、快速,且易操作,因而被广泛应用。酶的生产方式、发酵条件及反应性不同,因而其活力对每一个反应条件都较敏感。了解其中机理及影响因素,对测定酶的活力值具有指导作用,而严格规范操作,呵以得到准确的测试结果。l 试验I.I试剂 1.8 mol/L硫酸,20%碘化钾溶液,10%七钼酸六铵溶液,0.5%淀粉指示剂,0.05 mol/L过氧化氢底物溶液,0.1 mol/L硫代硫酸钠标准滴定溶液,TF-160过氧化氢酶。1.2操作步骤1.2.1 过氧化氢酶溶液的配制 取l mL过氧化氢酶TF-160原液,用蒸馏水稀释,定容至500 mL以备测试。1.2.2酶促反应 吸取一定量的酶稀释液于250 mL碘量瓶中,按照表1的操作以及相关溶液的用量,进行过氧化氢酶酶活的测试,同时做空白试验。根据酶活定义,计算过氧化氢酶酶活力值。 表1 过氧化氢酶酶活分析测试步骤及取液情况 注:酶液必须现配现用,并注意摇匀,以使反应完全。1.3 过氧化氢酶TF.160应用工艺 漂白后先冷洗或喷洗。 过氧化氢酶TF一160/(g/L) 间歇式设备0.05~0.1 连续式设备0.5~3温

度/℃ 20~30

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