经Cu2+处理后H2O2预处理条件选择各因子水平如下: A——反应温度(℃) A1=40 A2=55 A3=70; B——H2O2(30%)浓度(ml/L) B1=10 B2=20 B3=40 C——反应pH值 C1=5.5 C2=7 C3=8.5; D——反应时间(min) D1=30 D2=60 D3=90 由极差数据:各因子对减量率的重要性依次为:D>B>A>C,即最重要的反应条件为时间,H2O2浓度次之,再有温度。可见,在相同酶处理条件下,减量率受H2O2反应中影响因素的主次顺序与影响二硫键减少的一致。即随着时间的延长和H2O2浓度的增加,Cu2+-羊毛催化H2O2分解生成HO.的量急剧增加,二硫键的量快速下降,减量率快速增加。因此进一步证明了预处理对蛋白酶催化水解羊毛的促进作用主要在于破坏二硫键。H2O2的氧化作用、氯剂的氧化作用、Na2SO3还原作用都会对胱氨酸的二硫键产生一定的破坏作用(反应如式3-1,3-2),有利于蛋白酶分子的进攻,这与前面的试验结果相符。氧化:
(3-1)还原:
(3-2)3.3.3 再通过单因子试验证明这种趋势,反应时间是较重要的影响因素 ①浸Cu2+条件:Cu2+处理C=5ppm,T=55℃,pH=5.5~6.0,t=20min浴比1∶50;H2O2处理T=55℃,C=20ml/L,pH=6~7,浴比1∶25。 ②不浸Cu2+处理条件:H2O2处理T=55℃,C=40ml/L,pH=11.0~11.5,稳定剂4.5g/l,浴比1∶25。 ③酶处理条件同上。 由图5可见,Cu2+-羊毛复合物与浓度为20ml/L的H2O2反应作预处理,再经酶处理的减量率随时间的
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