2.2漆酶的固定
漆酶固定工艺对固定化酶的催化活性有很大的决定作用.采用何种工艺进行固定,除了酶的活力,还要考虑最终的催化效果、失活与再生能力、固定化试剂的毒性等因素,更重要的还取决于所使用的固定化载体材料.国内外对漆酶固定的研究在近些年有不少报道,所采用的载体有壳聚糖[281、海藻酸钠凝胶[291及PVAtol等,其中文献[31]还对近几十年来科研工作者利用不同支撑材料固定漆酶的研究成果进行了综述.
目前,固定化漆酶应用较为成熟的是在废水脱色[32-33]方面,因此对这方面研究中漆酶的固定做一简要介绍.8印染助剂27卷A.Kunamneni等人[3211∞利用环氧基活化的聚甲基丙烯酸酯基聚合物为载体,将漆酶进行共价固定的研究卓有成效,不但显著提高了漆酶对pH、温度、储藏时间的稳定性,而且重复利用17次之后酶活性仍保持在84%.他们将酶制剂DeniLiteIIS溶解于0.1mol/L醋酸钠缓冲溶液(pH=4.51中,通过离心和过滤使之最终质量浓度为5g/L,然后用1mol/L碳酸钠缓冲溶液将其pH值调至9.0,放人载体[m(漆酶):m(载体)=1:1O,]于室温下搅拌反应24h,然后过滤,用0.1mol/L醋酸钠缓冲溶液清洗,真空干燥即得.WANGPing等人[33]150先将漆酶包埋在与聚乙二醇混合的海藻酸钠/明胶颗粒中(挤入到2.0%的CaC1溶液中,迅速成形),在4℃下与交联剂戊二醛反应2h,然后用0.1mol/L(pH=7.0)磷酸盐缓冲溶液反复冲洗颗粒,干燥即得固定化酶.
2.3木聚糖酶的固定
朱启忠等人曾尝试采用壳聚糖、海藻酸钠为载体,结合微胶囊技术对木聚糖酶进行固定1,但是研究结果是酶固定率不太理想(39.4%).而采用共价结合法则可以进一步提高酶活回收率,但是共价法通常需要通过接枝反应在载体中引人具有可以与酶反应的基团.最近A.Sarbu等人[35]通过自由基过氧化物的激发将丙烯酰胺接枝到醋酸纤维薄膜上,引入能够与交联剂反应的一CONH,为获得高酶活回收率的固定化木聚糖酶提供了可能.到目前为止,对木聚糖酶的固定研究还不多,其在工业中的应用还有待研究.
3新型生物酶在漂白中的应用
3.i葡萄糖氧化酶对棉织物的漂白
诸多研究表明:用葡萄糖氧化酶代替化学漂白剂来实现对棉织物的生物漂白处理应用前景极好[3-4]不仅在纺织品的印染加工中有所应用,还可将葡萄糖氧化酶加入到洗涤剂中制成日常的洗涤用品[361,对于咖啡、茶渍、红酒等的去除有特殊效果.GOD对棉织物漂白通常以退浆f淀粉浆料=4%(ow1)]后废液为原料,如果用淀粉酶退浆,则可以使淀粉分解为葡萄糖,可直接用于葡萄糖氧化酶的催化反应.葡萄糖氧化酶对棉织物的漂白一般分为:f1)在一定条件下用GOD催化葡萄糖氧化,产生足量的H202以满足漂白的需要;(2)用产生的过氧化氢溶液进行漂白处理.其中,如何保证产生足量的H2o是整个应用过程的关键.P.Anis等人I7187~8通过研究影响产生HO量的因素(如GOD用量、pH值、温度、处理时间、葡萄糖用量)得出了最佳工艺:pH4.1(醋酸调节)、GOD[酶活10U/g,用量0.O1%(owf)1、55℃处理45min、葡萄糖用量4024mg/L.采用此法产生的H202质量浓度为800~1000mg/L.T.Tzanov等人在研究中还发现,通风条件对过氧化氢的产量起着很关键的作用[313,因为在反应过程中需要有氧气的参与.在对漂白应用的研究方面,通过对酶法漂白和传统化学试剂漂白效果的比较,以CIE白度为指标,得出了合理的漂白工艺,结果如表1所示.
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