2．1葡萄糖氧化酶的固定
科研工作者已经采用不同的方法尝试将葡萄糖氧化酶固定于多种不溶性的载体如硅胶[24]、丝素膜、活性炭素等[4,25-26]上，但所得固定化葡萄糖氧化酶主要用于制备电化学生物传感器．笔者所了解到的最早将葡萄糖氧化酶进行固定并用于棉织物漂白的是K．0p-wis等人．[27]349他们分2步将葡萄糖氧化酶固定于棉织物上：(1)将退浆棉织物置于三聚氯氰(2，4，6-三氯-l，3，5-三嗪)和1，4-重氮二环(2，2，2)辛烷(DABCO)的l，4-二氧杂环乙烷溶液中，于室温下搅拌3h。之后用1,4-二氧杂环乙烷反复冲洗，并用丙酮萃取6h，彻底除去三嗪和未溶解的DABCO；(2)将风干的棉织物浸没于葡萄糖氧化酶的硼酗盐酸缓冲溶液中，于室温下搅拌1h，然后冷却、水洗、干燥，即得固定化酶．在漂白时将固定化酶和游离酶置于漂液中即可，但是由于所用试剂存在极大的安全隐患，因此有必要进一步研究．而T．Tzanov等人[4]88,以疏松多孔的氧化铝和玻璃泡沫颗粒为载体，戊二醛为交联剂对葡萄糖氧化酶进行了固定：先将载体于45℃置于4％1-氨丙基三乙氧基硅烷的丙酮溶液中硅烷化，反应24h后水洗，干燥后，在室温下于2％戊二醛水溶液中浸没2h，最后将载体置于酶液中，室温下反应16h，多次水洗后即得固定化酶．通过2种载体固定化酶产生H202的对比发现，玻璃泡沫载体比氧化铝载体好，但是对于后续漂白过程中的搅拌通风及碱性等条件抵抗力较差，不利于重复利用；而氧化铝载体虽然耐剧烈条件能力较强，但是重复利用5次之后，酶活急剁下降，因此固定效果也不是很理想，还有待进一步研究．
2．2漆酶的固定
漆酶固定工艺对固定化酶的催化活性有很大的决定作用．采用何种工艺进行固定，除了酶的活力，还要考虑最终的催化效果、失活与再生能力、固定化试剂的毒性等因素．更重要的还取决于所使用的固定化载体材料．国内外对漆酶固定的研究在近些年有不少报道。所采用的载体有壳聚糖瞄I、海藻酸钠凝胶1291及PVA[30]等，其中文献[31]还对近几十年来科研工作者利用不同支撑材料固定漆酶的研究成果进行了综述．目前，固定化漆酶应用较为成熟的是在废水脱色[32-33]方面，因此对这方面研究中漆酶的固定做一简要介绍．A．Kunamneni等人[32]169-170利用环氧基活化的聚甲基丙烯酸酯基聚合物为载体，将漆酶进行共价固定的研究卓有成效，不但显著提高了漆酶对pH、温度、储藏时间的稳定性，而且重复利用17次之后酶活性仍保持在84％．他们将酶制剂DeniLite II S溶解于0．1mol／L醋酸钠缓冲溶液(pH=4．5)中，通过离心和过滤使之最终质量浓度为5 g／L，然后用1 mol／L碳酸钠缓冲溶液将其pH值调至9．0，放入载体[m(漆酶)：m(载体)=1：10]，于室温下搅拌反应24h，然后过滤，用0．1mol／L醋酸钠缓冲溶液清洗，真空干燥即得．WANG Ping等人[33]1520先将漆酶包埋在与聚乙二醇混合的海藻酸钠／明胶颗粒中(挤入到2．0％的CaCl2溶液中，迅速成形)，在4℃下与交联剂戊二醛反应2h，然后用0．1mol／L(pH=7．0)磷酸盐缓冲溶液反复冲洗颗粒，干燥即得固定化酶．
2．3木聚糖酶的固定
朱启忠等人曾尝试采用壳聚糖、海藻酸钠为载体，结合微胶囊技术对木聚糖酶进行固定[34]，但是研究结果是酶固定率不太理想(39．4％)．而采用共价结合法则可以进一步提高酶活回收率，但是共价法通常需要通过接枝反应在载体中引入具有可以与酶反应的基团．最近A．Sarbu等人[351通过自由基过氧化物的激发将丙烯酰胺接枝到醋酸纤维薄膜上，引入能够与交联剂反应的—CONH2，为获得高酶活回收率的固定化木聚糖酶提供了可能．到目前为止，对木聚糖酶的固定研究还不多，其在工业中的应用还有待研究．新型生物酶在漂白中的应用
3．1葡萄糖氧化酶对棉织物的漂白
<<上一页[1][2][3][4][5][6][7][8]下一页>>
相关信息 
推荐企业 推荐企业
推荐企业
您所在的位置：
